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 일반화학실험 레포트 - HPLC에 의한 아데닌과 카페인 |
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| 소개글 |
일반화학실험 레포트 - HPLC에 의한 아데닌과 카페인의 분리 |
| 요약 |
1. Introduction
HPLC란 High Performance Liquid Chromatography의 약자로써 고성능 액체 크로마토그래피라고 한다. HPLC는 일반적인 액체 크로마토그래피에서 입자는 더욱 작게하고 더욱 가는 컬럼을 사용한다. 이때 느려지는 액체의 통과속도를 보정하기 위해 적절한 고압을 가하여 기체 크로마토그래피와 같은 속도로 뛰어난 분리 능력을 얻을 수 있다.
이 실험에서는 HPLC와 UV detector를 이용하여 카페인과 아데닌을 검출해 보고, 카페인과 아데닌의 혼합용액을 이용하여 각각의 물질이 어떤 파장에서 좋은 결과를 보이는지 확인한다. 또한 농도가 다른 카페인 용액을 이용하여 농도와 흡광도 사이의 관계를 찾아봄으로써 궁극적으로 커피 속에 포함되어 있는 카페인의 농도를 추정할 것 이다.
2. Data&Result
(1)카페인과 아데닌의 검출(260nm 파장에서)
물질에 쏘여진 빛=반사+흡수+통과
Lambert 법칙 과도 관련
흡수된 빛의 분율은 통과되는 물질층의 두께에 비례한다.
=> 전기적 에너지를 이용하여 측정
카페인과 아데닌 자외선 흡수
카페인이 늦게 검출됨
(2)아데닌과 카페인 혼합용액 (파장별로)
물질별로 흡수하는 파장이 다르다
기본적으로 최외각전자의 에너지 상태가 물질마다 다르기 때문입니다. 화학2에 보시면 주양자수와 부양자수에 따라 오비탈에 채워지는 에너지가 다릅니다.
빛을 흡수하면 최외각 또는 내각 전자가 바깥궤도로 전이해야 하고 그 에너지 차이에 해당하는 만큼의 에너지를 받아야만 합니다.
반대로 방출하는 경우에는 반대로 그 에너지 차이만큼에 해당하는 에너지를 방출합니다
역시 마찬가지. 카페인과 아데닌도 각각 파장대별로 다른 흡광도
아데닌 260nm
카페인 270nm
(3)카페인의 농도와 흡광도 사이의 관계(270nm)
세 번째 (2)토대로 270nm에서 농도별로 검출시켜보았다
모양비슷->축을 보면 증가
결과를 바탕으로 그래프
대략적으로 일차함수관계-> |
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